穆利斯pcr(生化PCR名词解释)
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生化PCR名词解释
聚合酶链式反应(英文:Polymerasechainreaction,缩写:PCR,又称多聚酶链式反应),是一项利用DNA双链复制的原理,在生物体外复制特定DN**段的核酸合成技术。透过这项技术,可在短时间内大量扩增目的基因,而不必依赖大肠杆菌或酵母菌等生物体。
凯利·穆利斯(KaryMullis)于1983年开发,当时他是Cetus公司的雇员,也是1993年诺贝尔化学奖的获得者,它是一种简单,廉价和可靠的方法复制DN**段,这个概念适用于现代生物学和相关科学的许多领域。
PCR可能是分子生物学中使用最广泛的技术。这种技术被用于生物医学研究,犯罪取证和分子考古学。
微生物复制是一个费时耗力的流程,首先要将DNA经限制酶剪裁,再利用连接酶(Ligase)加到运载体(Vector)中,之后利用瞬间电击(Electroporation)或是热休克(HeatShock)的方式,送到大肠杆菌感受态细胞(competentcell)中;
将此菌于培养皿大量繁殖培养,再经过繁复的分离、纯化过程,时间通常需要近一周,才能大量复制片段。
所以仅需一小时的PCR能节省大量时间和繁复的操作,聚合酶链式反应技术被广泛地运用在医学和生物学的实验室,例如用于判断检体中是否会表现某遗传疾病的图谱、传染病的诊断、基因复制,以及亲子鉴定。
参考资料:百度百科-聚合酶链式反应
为什么taq酶在pcr过程中会引入错误的碱基
TaqDNA聚合酶无3’→5’外切酶活性。因而无校正功能,在复制新链的过程中会发生碱基错配。TaqDNA聚合酶在每次循环中产生的碱基替换率为1/8000,故扩增的片段越长,错配的机率越高。PCR是由美国科学家穆利斯提出的一种体外简化条件下模拟DNA体内复制的DNA快速扩增的方法,此技术获得1993年诺贝尔化学奖。
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